抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)
主要检测免疫效应细胞(如 NK 细胞)识别和杀伤抗体结合的靶细胞的能力。这种机制对许多治疗性抗体的作用至关重要,尤其是在癌症免疫疗法中。
主要特点:
效应细胞:NK细胞是主要的免疫杀伤细胞,但其他免疫细胞包括巨噬细胞,中性粒细胞和其他表达Fc受体的细胞同样可以作为效应细胞。
靶细胞:主要包括一系列的肿瘤细胞系,病毒感染的细胞或表达可以被治疗抗体识别的抗原的改造细胞。
抗体相互作用:利用治疗性抗体或单克隆抗体与靶细胞上的抗原特异性结合,通过 Fcγ 受体触发效应细胞活化
杀伤检测:细胞毒性的测量方法有:流式细胞术评估靶细胞死亡程度;发光法测定 ATP 含量(表明细胞存活率);或高含量成像法观察和量化细胞杀伤情况。
抗体依赖性吞噬作用(ADCP)
检测法评估抗体如何有效地促进巨噬细胞等免疫细胞吞噬靶细胞。这一过程对于清除体内被抗体包裹的病原体、死亡细胞或癌细胞非常重要。
主要特点:
效应细胞:主要使用表达 Fcγ 受体(如 FcγRIIa (CD32a)、FcγRI (CD64) 和 FcγRIIIa (CD16a) 的单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞
吞噬活性:评估效应细胞吞噬和消化抗体结合的靶细胞的能力,这是免疫防御和治疗抗体功能的关键机制。靶细胞:包括肿瘤细胞、受感染细胞或用特异性抗体标记的用于吞噬的微粒。
检测分析:基于方法的不同,可以直接进行检测,例如通过流式细胞仪或高含量成像技术测量吞噬作用;也可以是间接的检测。例如测量报告基因的活性,作为 Fcγ 受体参与和后续信号传导的替代。
补体依赖性细胞毒性(CDC)
主要是测量抗体激活补体系统进而引起靶细胞裂解的能力,这种机制对某些治疗性抗体的作用至关重要,尤其是在治疗血液肿瘤时。
主要特点:
补体来源:利用人体血清或血浆作为补体蛋白来源,在抗体与靶细胞结合后启动补体级联反应
靶细胞:重点研究表达治疗抗体目标抗原的细胞系或原代细胞,如表达CD20的淋巴瘤 B 细胞膜攻击复合物 (MAC) 的形成:补体级联的终点,MAC 在靶细胞膜上形成孔隙,导致细胞裂解。
检测方法:细胞内成分(如乳酸脱氢酶)释放的检测;流式检测标记的细胞量的变化;细胞活力检测。