在迅速发展的免疫学和免疫疗法领域,了解免疫抑制的机制对于开发治疗自身免疫性疾病、癌症和慢性感染的有效方法至关重要。体外免疫抑制试验对于在一领域中的研究,可帮助人们深入了解各种因素如何影响免疫系统的自我调节能力。这些检测有助于评估调节细胞、药物和其他免疫调节剂对免疫反应的抑制作用。这里,我们将概述三种主要的免疫抑制类型:T细胞抑制测定、Treg 介导的抑制测定和 T 细胞耗竭测定。
T 细胞抑制试验
T 细胞抑制试验服务旨在评估各种免疫抑制剂对 T 细胞功能的抑制作用,尤其侧重于原代T 细胞。这项检测对于了解特定因子如何通过抑制 T 细胞活性来调节免疫反应至关重要,为开发免疫疗法、治疗自身免疫性疾病和移植耐受策略提供了宝贵的见解。
主要抑制因子:我们主要评估了腺苷、前列腺素 E2(PGE2)和 转化生长因子-β(TGF-β)等众所周知的免疫抑制因子对 T 细胞功能的影响,这些因子中的每一种都在调节免疫反应中起着关键作用。白细胞介素-2 (IL-2)分泌:用于评估 T 细胞活性的主要方法是测量 IL-2 的释放,IL-2是 T 细胞增殖和活化的关键细胞因子。对于腺苷和PGE2等药剂,我们通过ELISA方法来量化 IL-2 水平,从而提供有关 T 细胞抑制程度的精确而可靠的数据。
TGF-β抑制实验:TGF-β的抑制作用主要体现在对T细胞增殖的抑制,因此在通过对T细胞活力的检测来评估其抑制作用。
调节性T细胞(Treg)介导的抑制实验: Treg抑制试验可评估Treg抑制效应 T 细胞(Teff)增殖的能力。这项检测对于了解调节性 T 细胞如何帮助维持免疫平衡至关重要,而免疫平衡是开发自身免疫性疾病、癌症和移植排斥疗法的关键。
在这项试验中,从人单个核细胞(PBMCs)中分离出原始CD4+ T 细胞,并将其诱导为Treg。然后将这些 Treg 与不同比例的 Teff 细胞进行共培养。通过流式细胞仪跟踪 Teff 细胞的增殖情况,可以了解 Treg的抑制能力。
这种检测方法特别适用于评估潜在治疗化合物对 Treg 功能的影响,有助于开发新的免疫疗法。
T细胞耗竭实验
T细胞衰竭通常出现在慢性感染和癌症,对于T细胞耗竭的检测有助于了解这些细胞在长期激活下的反应,以及潜在疗法如何恢复它们的功能。在该试验中,先诱导 T 细胞衰竭,然后通过几个关键标记进行评估:
干扰素γ(IFN-γ)释放实验:通过使用衰竭 T 细胞和树突状细胞(DCs)的 混合淋巴细胞反应(MLR)试验,测量IFN-γ 的分泌来评估衰竭 T 细胞典型的效应功能减弱情况。
表达量变化:在T细胞耗竭的过程中,伴随着PD-1/PD-L1表达量的不断增加,它们是T耗竭的重要指标。IL-2分泌:通过测量耗竭 T 细胞在不同时间点释放的 IL-2 来评估其了解衰竭的严重程度和功能恢复的潜力
这种检测方法特别适用于评估逆转 T 细胞衰竭的免疫疗法(如检查点抑制剂)的有效性,并为开发肿瘤和慢性疾病治疗方法提供了宝贵的数据。